本发明提供一种青蒿WRKY类转录因子AaWRKY4基因及应用。AaWRKY4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;AaWRKY4蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。过量表达AaWRKY4基因提高青蒿中青蒿素含量的方法如下:从青蒿中克隆青蒿WRKY类转录因子AaWRKY4基因;构建含AaWRKY4基因的植物表达载体;用根癌农杆菌介导,将AaWRKY4基因转入青蒿并再生出植株本发明提供的转AaWRKY4基因青蒿的青蒿素含量比非转化青蒿提高了35%‑50%,为青蒿素的规模化生产提供了高产、稳定的植物基源。
具体包括基因AaWRKY2的克隆、含有该基因的植物表达载体的构建、该基因对青蒿素生物合成途径特有基因启动子的激活作用。上述青蒿AaWRKY2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了AaWRKY2基因具有能够激活青蒿素生物合成途径特异的ADS和DBR2这2个基因启动子表达的特性。本发明中AaWRKY2基因可通过过量表达等应用于青蒿品质改良,可提高青蒿中青蒿素的含量。
本发明提供了一种红掌抗逆相关转录因子AaWRKY24,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述抗逆相关转录因子AaWRKY24积极响应低温胁迫,能够显著响应红掌低温胁迫,生理实验数据证明也可以提高烟草的抗寒能力,为红掌耐寒性分子育种提供了候选基因,对降低红掌的生产成本具有重要的意义。